มาลองทำ NMR . เชิงปริมาณกัน
ปัญหา 8
ในเจ็ดประเด็นก่อนหน้านี้ เราได้นำเสนอภาพรวม รวมถึงภูมิหลังของ NMR เชิงปริมาณ จากฉบับนี้เราจะนำเสนอเนื้อหาที่ใช้งานได้จริง
การเตรียมพร้อม
ก่อนดำเนินการวัด NMR เชิงปริมาณจริง จำเป็นต้องมีการเตรียมการบางอย่างล่วงหน้า ได้แก่ (1) การเลือกวิธีการวัดเชิงปริมาณ (วิธีมาตรฐานภายในหรือวิธีมาตรฐานภายนอก) (2) การกำหนดเงื่อนไขการเตรียมตัวอย่าง (การเลือกตัวทำละลายและมาตรฐานอ้างอิงสำหรับ qNMR ความเสถียรของสารละลายตัวอย่าง) และ (3) ยืนยันว่าสัญญาณที่เหมาะสมสำหรับการหาปริมาณปรากฏบน 1สเปกตรัม H-NMR ในที่นี้ เราจะแนะนำการเลือกวิธีการวัดเชิงปริมาณโดยสังเขป
สำหรับวิธีมาตรฐานภายใน มาตรฐานอ้างอิงสำหรับ qNMR ถูกจัดเตรียมในสารละลายเดียวกันกับตัววิเคราะห์ สำหรับวิธีมาตรฐานภายนอก มาตรฐานอ้างอิงสำหรับ qNMR และสารวิเคราะห์จะถูกจัดเตรียมแยกกัน ประเด็นที่ต้องพิจารณาเมื่อตัดสินใจว่าจะเลือกวิธีการใดคือความถูกต้องหรือการกู้คืนของตัวอย่างมีความสำคัญสูงกว่า หากต้องการเน้นความถูกต้อง ขอแนะนำให้ใช้วิธีมาตรฐานภายใน ในทางกลับกัน หากวิเคราะห์วัสดุล้ำค่าซึ่งเป็นสารที่แยกได้เพียงชนิดเดียว วิธีมาตรฐานภายนอกน่าจะดีกว่า
รูปที่ 2 มาตรฐานภายในและวิธีมาตรฐานภายนอก
แบบแผนการวิเคราะห์ของ NMR . เชิงปริมาณ
NMR เชิงปริมาณด้วยวิธีการมาตรฐานภายในหรือวิธีมาตรฐานภายนอกมีสามขั้นตอน:
การเตรียมตัวอย่าง → การวัด NMR → การวิเคราะห์
รูปที่ 1 ผังงานการวิเคราะห์ qNMR
1) วิธีมาตรฐานภายใน (ภาพที่ 3 ขั้นตอนวิธีมาตรฐานภายใน)
การเตรียมตัวอย่าง: ยืนยันความแม่นยำของเครื่องชั่งที่จะใช้ ชั่งน้ำหนักมาตรฐานอ้างอิงสำหรับ qNMR และตัววิเคราะห์อย่างแม่นยำ ขอแนะนำให้สร้าง 3 ตัวอย่างจากล็อตเดียวกัน
การวัด NMR: ดำเนินการวัด 1H ภายใต้สภาวะที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการหาปริมาณ หนึ่งในพารามิเตอร์ที่ควรสังเกตคือการตั้งค่าเวลาการเกิดซ้ำของพัลส์ ตั้งเวลาทำซ้ำนานเพียงพอตาม T1 (เวลาผ่อนคลายตามยาว) เราขอแนะนำให้คุณดำเนินการวัดสามครั้งกับตัวอย่าง qNMR แต่ละรายการ
การวิเคราะห์: เมื่อประมวลผล FID การประมวลผลบางอย่างสามารถทำได้โดยอัตโนมัติ แต่ขอแนะนำให้ตรวจสอบโดยการตรวจสอบด้วยสายตา
รูปที่ 3 ขั้นตอนวิธีการมาตรฐานภายใน
2) วิธีมาตรฐานภายนอก (รูปที่ 4 ขั้นตอนวิธีมาตรฐานภายนอก)
การเตรียมตัวอย่าง: ยืนยันความถูกต้องของเครื่องชั่งที่จะใช้ ชั่งน้ำหนักมาตรฐานอ้างอิงสำหรับ qNMR และตัววิเคราะห์แยกกันอย่างแม่นยำ ในกรณีนี้ สิ่งสำคัญคือต้องทราบความเข้มข้นของโมลาร์ที่แม่นยำของมาตรฐานอ้างอิงสำหรับการหาปริมาณ
การวัด NMR: การวัดจะดำเนินการภายใต้สภาวะเชิงปริมาณ แต่จำเป็นต้องมีการสอบเทียบ เช่น การวัดอุณหภูมิและความกว้างพัลส์ เพื่อเปรียบเทียบสเปกตรัมของสารละลายอ้างอิงและสเปกตรัมของสารละลายตัวอย่างเชิงวิเคราะห์
การวิเคราะห์: เช่นเดียวกับวิธีการมาตรฐานภายใน การตรวจสอบด้วยสายตาหลังการประมวลผลเป็นสิ่งที่จำเป็น เมื่อทำการคำนวณ ขึ้นอยู่กับพารามิเตอร์การวัดของตัวอย่าง qNMR แต่ละรายการ การคำนวณจะต้องรวมปัจจัยการสอบเทียบด้วย
รูปที่ 4 ขั้นตอนสำหรับวิธีมาตรฐานภายนอก
คุณเป็นผู้เชี่ยวชาญทางการแพทย์หรือบุคลากรที่เกี่ยวข้องกับการรักษาพยาบาลหรือไม่?
ไม่
โปรดทราบว่าหน้าเหล่านี้ไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อให้ข้อมูลเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์แก่ประชาชนทั่วไป