ปิด Btn

เลือกไซต์ภูมิภาคของคุณ

ปิดหน้านี้

กล่องเครื่องมือ NMR แบบโซลิดสเตต MAS แบบรวดเร็วสำหรับโมเลกุลชีวภาพ

NM210002E

Solid-state NMR เป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์ในการอธิบายโครงสร้างโปรตีน ทั้งๆ ที่เต็มที่ 13C และ 15จำเป็นต้องมีตัวอย่างที่ติดฉลาก N ตัวอย่าง โซลิดสเตต NMR ให้ข้อมูลเสริมหรือข้อมูลเฉพาะที่ไม่สามารถเข้าถึงได้โดยวิธีการทั่วไปอื่นๆ ตัวอย่างเช่น โดยหลักการแล้ว ไม่มีขีดจำกัดบนหรือล่างสำหรับน้ำหนักโมเลกุลใน NMR แบบโซลิดสเตต ซึ่งแตกต่างจากโซลูชัน NMR และ cryo EM นอกจากนี้ NMR แบบโซลิดสเตตยังเป็นตัวตรวจสอบที่ละเอียดอ่อนมากของพลวัตในท้องถิ่น หนึ่งในสิ่งกีดขวางของ NMR แบบโซลิดสเตตคือปริมาณตัวอย่าง อันที่จริง จำเป็นต้องมีตัวอย่าง 20 – 50 มก. ที่ติดฉลากอย่างครบถ้วน (ราคาแพง!) สำหรับโรเตอร์ MAS 3.2 มม. / 4 มม. อย่างไรก็ตาม การพัฒนาล่าสุดทำให้อัตรา MAS สูงกว่า 70 kHz เปลี่ยนแปลงสถานการณ์โดยสิ้นเชิง [1] อันที่จริง โรเตอร์ MAS 0.75 มม. (1 มม.) ที่ใช้สำหรับการทดลอง MAS ที่รวดเร็ว (สูงสุด 120 (80) kHz) ต้องการตัวอย่างเพียง 290 (800) nL เท่านั้น ทำให้สามารถตรวจวัด NMR แบบโซลิดสเตตบนปริมาณมิลลิกรัมย่อยของ ตัวอย่าง. ข้อได้เปรียบที่ยอดเยี่ยมอีกประการของ MAS ที่รวดเร็วคือการหาค่าเฉลี่ยจากปฏิกิริยาแอนไอโซโทรปิกส่วนใหญ่ ทำให้สามารถใช้แผนพลังงานต่ำ (การแยกส่วน การควบแน่น การแยกขั้ว ฯลฯ) ซึ่งจะช่วยหลีกเลี่ยงไม่ให้ตัวอย่างร้อน ความละเอียดสูง 1H spectra จะพร้อมใช้งานในสภาวะเหล่านี้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับโปรตีน microcrystalline นี่คือข้อได้เปรียบที่ใหญ่ที่สุดของ MAS ที่รวดเร็ว เนื่องจาก 1การตรวจจับ H ช่วยเพิ่มความไวได้อย่างมากเมื่อเทียบกับแบบดั้งเดิม 13การตรวจจับซี ด้วยเหตุนี้ NMR แบบโซลิดสเตตของ MAS ที่รวดเร็วจึงเป็นเครื่องมืออเนกประสงค์ในการศึกษาโครงสร้างและพลวัตของชีวโมเลกุล ซึ่งขั้นตอนแรกคือการกำหนดเรโซแนนซ์เฉพาะลำดับ ด้วยเหตุนี้ การทดสอบที่จำเป็นสำหรับการกำหนดแบ็คโบนและไซด์เชนแบบต่อเนื่องจึงถูกสร้างขึ้นมาอย่างดี [2] ในที่นี้ เราขอแนะนำกล่องเครื่องมือที่มีให้สำหรับซอฟต์แวร์ Delta พร้อมตัวอย่างโปรตีน Het-s (226-280) ที่มีโปรตอนเต็มที่

[1] รีวิว: Y. Nishiyama, Solid State Nucl. แม็กน. เรสัน. 78 (2016) 24-36.
[2] E. Barbet-Massin et al., J. Am. เคมี. ซ. 136 (2014) 12489-12497.

รูปที่ 1 สเปกตรัม 3D hCaNH ของ Het-s (226-280) วัดโดยใช้โพรบ HCN MAS 1 มม. กับสเปกโตรมิเตอร์ JNM-ECZ900R ที่ 21.1 T อัตรา MAS ตั้งไว้ที่ 70 kHz
เอื้อเฟื้อข้อมูลโดย Prof. Antoine Loquet (Université Bordeaux) และ Dr. Yusuke Nishiyama (RIKEN)

รูปที่ 2 พื้นฐาน 2D 1H/15N การทดลองสหสัมพันธ์ สี่เหลี่ยมที่เติมและเปิดแสดงถึงพัลส์ π/2 และ π ตามลำดับ

รูปที่ 2 (ต่อ) hCONH และ hCaNH เพื่อโพรบที่ถูกผูกมัด 13C/15N/1การเชื่อมต่อ H

รูปที่ 2 (ต่อ) การทดลอง hcaCbcaNH และ hcoCAcoNH สำหรับไซด์เชนและแบ็คโบน [3]

[3] E. Barbet-Massin และคณะ, J. Biomol น.ม. 56 (2013) 379-386.

รูปที่ 3 การกำหนดลำดับของสัญญาณแกนหลักของ Het-s (226-280) ที่วัดโดยใช้โพรบ HCN MAS 1 มม. พร้อมสเปกโตรมิเตอร์ JNM-ECZ900R ที่อัตรา 21.1 T. MAS ตั้งไว้ที่ 70 kHz มีการแสดงแถบ CH ของสเปกตรัม hCaNH และ hcoCAcoNH
เอื้อเฟื้อข้อมูลโดย Prof. Antoine Loquet (Université Bordeaux) และ Dr. Yusuke Nishiyama (RIKEN)

โปรดดูไฟล์ PDF สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม
หน้าต่างอื่นจะเปิดขึ้นเมื่อคุณคลิก

PDF1,740.8KB
ปิดหน้านี้
แจ้งให้ทราบ

คุณเป็นผู้เชี่ยวชาญทางการแพทย์หรือบุคลากรที่เกี่ยวข้องกับการรักษาพยาบาลหรือไม่?

ไม่

โปรดทราบว่าหน้าเหล่านี้ไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อให้ข้อมูลเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์แก่ประชาชนทั่วไป

พื้นฐานวิทยาศาสตร์

คำอธิบายง่ายๆ เกี่ยวกับกลไกและ
การใช้งานผลิตภัณฑ์ JEOL

ติดต่อ

เจอีโอแอล ให้บริการสนับสนุนที่หลากหลายเพื่อให้แน่ใจว่าลูกค้าของเราสามารถใช้ผลิตภัณฑ์ของเราได้อย่างสบายใจ
โปรดติดต่อเรา