การสังเกต NOE โดย HSQC-NOESY

NM200005E

ความสัมพันธ์ระหว่าง NOE (Nuclear Overhauser Effect) ประกอบด้วยข้อมูลสำคัญในการประเมินระยะห่างระหว่างนิวเคลียร์และกำหนดโครงสร้าง
อย่างไรก็ตาม จุดพีคของความสัมพันธ์ NOE นั้นอ่อนแอมากเมื่อเทียบกับพีคในแนวทแยงใน 2D NOESY ด้วยเหตุนี้ จึงเป็นเรื่องยากที่จะสังเกตจุดพีคของความสัมพันธ์ NOE ในบริเวณใกล้เคียงกับพีคในแนวทแยงที่ใหญ่กว่ามาก ในกรณีเช่นนี้ HSQC-NOESY สามารถบรรเทาปัญหาได้เนื่องจากตรวจไม่พบยอดในแนวทแยง ในทางกลับกัน สิ่งสำคัญคือต้องคำนึงถึงความไวต่ำ
รูปที่ 1 แสดงการขยายสเปกตรัม NOESY ของไดฟีนิล(45-trimethybenzol)ฟอสฟีนออกไซด์ 2,4,6 มก. ใน CDCl₃. มีเพียงความสัมพันธ์ H3/H1 เท่านั้นที่สังเกตได้อย่างชัดเจนในบริเวณอะโรมาติก เป็นการยากที่จะบอกว่ามีความสัมพันธ์ระหว่าง H1 และ H4 หรือไม่
รูปที่ 2 แสดงลำดับการเต้นของชีพจร ¹H-¹³C HSQC-NOESY. การทดสอบนี้ไม่ได้ใช้ ¹³C การแยกตัวออกในช่วงเวลาการได้มา และด้วยเหตุนี้ความสัมพันธ์ของ HSQC จึงถูกสังเกตว่าเป็นสองเท่าเนื่องจาก ¹J_CH. ในทางกลับกัน ความสัมพันธ์ NOE ในเชิงบวกจะถูกสังเกตด้วยเฟสตรงข้ามเมื่อเปรียบเทียบกับความสัมพันธ์ HSQC สิ่งนี้ทำให้การเลือกปฏิบัติของ HSQC และ HSQC-NOESY สูงสุดเป็นไปได้และลดการทับซ้อนกัน
สเปกตรัม HSQC-NOESY ของตัวอย่างเดียวกันแสดงในรูปที่ 3 นอกจากค่าสูงสุดของความสัมพันธ์ H4/H1 ที่ไม่สามารถสังเกตได้ในสเปกตรัม NOESY เนื่องจากสัญญาณทับซ้อนกับสัญญาณในแนวทแยง ความสัมพันธ์ของ H3/H3 นอกจากนี้ยังสามารถสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางเคมีที่เหมือนกันได้ ดูรูปที่ 4 สำหรับสูตรโครงสร้างของไดฟีนิล(2,4,6-trimethybenzol)ฟอสฟีนออกไซด์และความสัมพันธ์ของ NOE ที่สังเกตได้ในสเปกตรัม HSQC-NOESY
If ¹³มีการใช้การแยก C ความสัมพันธ์ H4/H1 และ H3/H3 NOE จะซ้อนทับกับความสัมพันธ์ HSQC ที่ค่อนข้างแข็งแกร่ง