CRAFT สำหรับ Delta Ver. 1.1 —การวิเคราะห์เชิงปริมาณของส่วนผสมของโมเลกุลที่คล้ายกัน— | หมายเหตุการใช้งาน

NM190002

หัตถกรรม (Complete Rการศึกษา Aความกว้าง Frequency Tสามารถ) [1] แนวคิดใหม่ของการประมวลผลข้อมูล NMR ความละเอียดสูงตามการวิเคราะห์แบบเบย์ [2] สามารถแปลงข้อมูลโดเมนเวลา NMR (FID; Fรี Iการประมูล Decay) ลงในสเปรดชีตประกอบด้วยแอมพลิจูดและความถี่ของแต่ละองค์ประกอบความถี่ โดยปกติ เราจะดึงข้อมูลเชิงปริมาณจากข้อมูล NMR โดยใช้การแปลงฟูริเยร์ด้วยการแก้ไขเฟส การแก้ไขเส้นฐาน ฯลฯ จากนั้นจึงนำการผสานรวมมาใช้ CRAFT มีศักยภาพที่จะเป็นแนวทางทางเลือกของขั้นตอนทั่วไปเหล่านั้น
CRAFT เป็นโซลูชันทางเลือกสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณด้วยตัวอย่างผสม การวิเคราะห์เชิงปริมาณด้วยตัวอย่างส่วนผสมเป็นสิ่งที่ท้าทายในด้านการวิจัยเนื่องจากสเปกตรัมคาบเกี่ยวกันโดยเฉพาะในส่วนผสมของสารประกอบที่คล้ายคลึงกัน การรวมเข้าด้วยกันแบบธรรมดาไม่เหมาะสำหรับการหาปริมาณสารประกอบแต่ละชนิดที่มียอดทับซ้อนกัน CRAFT สามารถดึงข้อมูลเชิงปริมาณที่มียอดที่ทับซ้อนกันได้ เนื่องจาก CRAFT ใช้ไซนัสอยด์ที่สลายตัวแบบทวีคูณ (รูปร่างเส้น Lorentzian) หลายตัวเป็นแบบจำลองของ FID ในหมายเหตุนี้ CRAFT สำหรับ Delta Ver. 1.1 ใช้งานบนซอฟต์แวร์ Delta NMR Ver. 5.3.1 ใช้สำหรับการวิเคราะห์ส่วนผสมเชิงปริมาณของสารประกอบทางเภสัชกรรมเพื่อแสดงพลังของ CRAFT สำหรับการวิเคราะห์ของผสม

¹H NMR ของส่วนผสมของสารประกอบทางเภสัชกรรม

ของผสมของอะซิเมทาซินและอินโดเมทาซินถูกใช้เป็นส่วนผสมทดสอบของสารประกอบที่คล้ายคลึงกัน (รูป 1). อะซิเมทาซินเป็นยาแก้อักเสบที่ไม่ใช่สเตียรอยด์ และอินโดเมทาซินเป็นสารต้านการอักเสบที่ออกฤทธิ์ของอะซิเมทาซิน จากมุมมองของโครงสร้างทางเคมี อะเซเมทาซินเป็นคาร์บอกซีเมทิลเอสเทอร์ของอินโดเมทาซิน โครงสร้างที่คล้ายคลึงกันของอะซิเมทาซินและอินโดเมทาซินในส่วนผสมส่งผลให้เกิดการเหลื่อมกันใน ¹สเปกตรัม H-NMR (รูป 1).

สเปกตรัม 1H-NMR ของส่วนผสมของอะซีมาตาซิน-อินโดเมธาซิน

รูป 1. ¹สเปกตรัม H-NMR ของส่วนผสมของอะซีมาตาซิน-อินโดเมธาซิน ซึ่งบันทึกบนสเปกโตรมิเตอร์ JNM-ECZ400S ด้วย ROYALPROBE™

สมัคร CRAFT

การวิเคราะห์ CRAFT ดำเนินการด้วยการตั้งค่าลายนิ้วมือในแต่ละจุดสูงสุด (รูปที่ 2 (a)). สเปรดชีตผลลัพธ์เป็นไปตามการตั้งค่าลายนิ้วมือ (รูปที่ 2 (b)). นอกจากนี้ยังได้รับการยืนยันว่าการแยกส่วนประกอบความถี่ระหว่างอะซิเมทาซินและอินโดเมทาซินนั้นดีมาก (รูปที่ 2 (c)). ดังนั้นปริมาณที่แน่นอนของอะซิเมทาซิน (ความบริสุทธิ์) สามารถกำหนดได้ด้วยแอมพลิจูดของอะซิเมทาซินและมาตรฐานภายใน* ด้วยสูตร (1)

P_{A} = \frac{A_{A}}{A_{s t d}} \cdot \frac{N_{s t d}}{N_{A}} \cdot \frac{m_{s t d}}{m_{A}} \cdot \frac{M_{A}}{M_{s t d}} \cdot P_{s t d}

　・・・(1)

Here พี, เอ, น, ม. และ M คือ ความบริสุทธิ์ แอมพลิจูด (หรืออินทิกรัล) จำนวนโปรตอน น้ำหนัก และมวลโมลาร์ ตามลำดับ ดัชนี A และมาตรฐานคือสารวิเคราะห์และสารประกอบอ้างอิง ตามลำดับ

* ความแม่นยำของแอมพลิจูดใน CRAFT ขึ้นอยู่กับรูปร่างของยอดและสเปกตรัมคาบเกี่ยวกัน ขอแนะนำให้ผสานรวมแบบทั่วไป หากความแม่นยำมีความสำคัญมากในการวิเคราะห์ (เช่น การวิเคราะห์เพื่อการประกันคุณภาพ)

รูป 2. CRAFT วิเคราะห์ส่วนผสมของอะซิเมทาซินและอินโดเมทาซิน
(ก) การตั้งค่าลายนิ้วมือ (b) ผลการวิเคราะห์ (c) การยืนยันการแยกส่วนสูงสุด สีเขียว: ส่วนประกอบความถี่ของอะซิเมทาซิน สีน้ำตาล: ส่วนประกอบอินโดเมทาซิน สีน้ำเงิน: ผลรวม

เพื่อแสดงพลังของ CRAFT สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบผสม ¹สเปกตรัม H NMR สำหรับการวิเคราะห์ CRAFT ถูกบันทึกโดยใช้ของผสม 4 ตัวที่มีความเข้มข้นต่างกันไปสำหรับอะซิเมทาซินและอินโดเมทาซินที่มี ca 1 มก. ของ 4,4-ไดเมทิล-4-ซิลาเพนเทน-1-กรดซัลโฟนิก-d6 (ดีเอสเอส-d6) เป็นสารมาตรฐานภายใน (ละลายใน DMSO-d6). JEOL JNM-ECZ400S NMR สเปกโตรมิเตอร์ที่มี JEOL ROYALPROBE™ ถูกใช้เพื่อรวบรวมข้อมูล NMR ¹การทดลอง H NMR เป็นไปตามพารามิเตอร์ที่แนะนำใน Japanese Industry Standard (JIS) K0138 [4] (ความกว้างสเปกตรัมสั้นๆ: 20 ppm, ความละเอียดดิจิทัล: 0.25 Hz, การหมุนตัวอย่างโดยไม่มีตัวอย่าง, w/ ¹³C การแยกส่วน, เวลาทำซ้ำของพัลส์: 64 วินาที) ปริมาณอะซิเมทาซินคำนวณด้วยแอมพลิจูด 2 พีค อันหนึ่งซ้อนทับกับอินโดเมทาซิน และอีกอันไม่ได้ (รูปที่ 3 (a)).
การเปรียบเทียบระหว่าง CRAFT และการรวมแบบธรรมดาแสดงใน รูปที่ 3 (b) และ (ค). ในการรวมเข้าแบบทั่วไป ความบริสุทธิ์ที่กำหนดโดย NMR ที่มีพีคที่ไม่ทับซ้อนกันเกือบจะเหมือนกับที่คำนวณจากน้ำหนัก อย่างไรก็ตาม ความบริสุทธิ์ที่กำหนดโดย NMR ที่มีพีคคาบเกี่ยวกันนั้นแตกต่างจากที่คำนวณจากน้ำหนัก ความบริสุทธิ์ที่กำหนดโดย CRAFT เกือบจะเหมือนกับที่คำนวณจากน้ำหนัก แม้ว่าจะมีการใช้จุดสูงสุดทับซ้อนกับอินโดเมทาซิน งานฝีมือ ¹การวิเคราะห์ข้อมูล H NMR ของข้อความผสมประสบความสำเร็จแสดงให้เห็นถึงพลังของ CRAFT สำหรับการวิเคราะห์ส่วนผสม NMR เชิงปริมาณ

รูป 3. การสาธิตพลังของ CRAFT สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบผสม
(ก) ¹H NMR spectra ของ 4 ส่วนผสมของอะซิเมทาซินและอินโดเมทาซิน ความบริสุทธิ์ที่กำหนดโดย NMR ด้วย (b) การรวมแบบธรรมดาและ (c) CRAFT

อ้างอิง

กฤษณมูรธี; เค, แม็กน. เรสัน. เคมี. (2013) 51, 821-829
เบรททอร์สท์; จีแอล, เจ แม็กน. เรสัน. (1990) 88, 533–551., เบรททอร์สท์; จีแอล, เจ แม็กน. เรสัน. (1990) 88, 552–570., เบรททอร์สท์; จีแอล, เจ แม็กน. เรสัน. (1990) 88, 571–595., เบรททอร์สท์; จีแอล, เจ แม็กน. เรสัน. (1991) 93, 369–394., เบรททอร์สท์; จีแอล, เจ แม็กน. เรสัน. (1992) 98, 501-523
หมายเหตุการสมัคร "CRAFT for Delta Ver. 1.1 — บทนำของพื้นหลังและส่วนต่อประสานผู้ใช้—" ( NM190001 ).
JIS K0138：2018 กฎทั่วไปสำหรับสเปกโทรสโกปีเรโซแนนซ์เรโซแนนซ์แม่เหล็กเชิงปริมาณ