การวิเคราะห์โครงสร้างของโมเลกุลขนาดเล็กโดยใช้ JMS-S3000 "SpiralTOF™-plus 2.0" ー การวัด MS/MS ของผลิตภัณฑ์การย่อยสลายด้วยแสงของรีเซอร์พีน ー [แอปพลิเคชัน MALDI]

MALDI-TOFMS ที่มีมวลละเอียดสูงสามารถระบุองค์ประกอบองค์ประกอบของสารประกอบเป้าหมายจากมวลที่แม่นยำที่วัดได้ การวัด MS/MS มีประสิทธิภาพในการอธิบายโครงสร้างทางเคมี ซึ่งยากต่อการอนุมานจากข้อมูลมวลที่แม่นยำ การวัด MS/MS โดยใช้ JMS-S3000 "SpiralTOF™-plus 2.0" พร้อมตัวเลือก TOF-TOF สามารถตรวจจับชิ้นส่วนไอออนที่เกิดจากการแยกตัวที่เกิดจากการชนกันของพลังงานสูง (HE-CID) HE-CID เป็นเทคนิคของการแตกตัวของไอออนตั้งต้นโดยการชนกันเพียงครั้งเดียว เป็นที่ทราบกันดีว่าให้ข้อมูลเชิงโครงสร้างมากกว่าการแยกตัวที่เกิดจากการชนกันของพลังงานต่ำ ซึ่งแตกตัวเป็นไอออนของสารตั้งต้นโดยการชนกันหลายครั้ง ในทางกลับกัน เนื่องจาก MALDI-TOFMS นั้นยากต่อการเชื่อมต่อออนไลน์ด้วยวิธีก่อนการแยกสาร เช่น โครมาโตกราฟีแบบของเหลว สารประกอบเป้าหมายจึงต้องถูกแยกออกด้วยมวลเท่านั้น จำเป็นต้องมีการเลือกไอออนของสารตั้งต้นสูงเพื่อให้ได้ข้อมูลโครงสร้างที่ถูกต้องสำหรับส่วนประกอบที่มีมวลใกล้เคียงกัน SpiralTOF™-plus 2.0 พร้อมตัวเลือก TOF-TOF สามารถบรรลุการเลือกไอออนของสารตั้งต้นได้สูงเนื่องจากเส้นทางการบินที่ยาวของออปติกไอออนแบบเกลียวที่ใช้ใน 1^st TOFMS. ในเอกสารการใช้งานนี้ เรารายงานการอธิบายเชิงโครงสร้างของผลิตภัณฑ์การย่อยสลายด้วยแสงของ reserpine เป็นตัวอย่างของการวิเคราะห์โครงสร้างของส่วนประกอบที่ใกล้เคียงกับการรบกวนที่เป็นไปได้ในมวลโดยการวัด MS/MS โดยใช้ตัวเลือก SpiralTOF™-plus 2.0 พร้อม TOF-TOF

เงื่อนไขการวัด

สารละลายเรสเซอร์พีนถูกแสงแดดในห้องเป็นเวลาสองสามวัน วิธีการเตรียมตัวอย่างและเงื่อนไขการวัดแสดงไว้ในตารางที่ 1 ส่วนผสมของตัวอย่างและสารละลายเมทริกซ์ถูกพบบนแผ่นเป้าหมายและผึ่งลมให้แห้ง การวัด MS และ MS/MS ดำเนินการที่จุดตัวอย่างเดียวกัน

ตารางที่ 1. การเตรียมตัวอย่างและเงื่อนไขการวัด

ผลสอบ

รูปที่ 1 แสดงผลการวัดในโหมดเกลียว โมเลกุลโปรตอน [M+H]⁺ ตรวจพบสารรีเซอร์พีนและผลิตภัณฑ์ย่อยสลายด้วยแสงที่ ม./ซ 609 และ ม./ซ 607 ซึ่งห่างกัน 2 u ตามลำดับ ทำการวัด MS/MS สำหรับ ม./ซ 607 และ ม./ซ 609 และได้รับสเปกตรัมมวลไอออนของผลิตภัณฑ์ที่แสดงในรูปที่ 2a และ 3a นา⁺ หรือเค⁺ ไม่มีอยู่ในสเปกตรัมมวลไอออนของผลิตภัณฑ์ทั้งสอง ซึ่งยืนยันว่าไอออนตั้งต้นคือ [M+H]⁺. การนำข้อมูลไอออนบวกไปใช้กับเงื่อนไขการประมาณค่าองค์ประกอบ ม./ซ 609 และ 607 ถูกจับคู่กับรีเซอร์พีนและรีเซอร์พีนดีไฮโดรจีเนต ตามลำดับ (รูปที่ 2b และ 3b) นอกจากนี้ยังสันนิษฐานว่าตำแหน่งของพันธะคู่ในผลิตภัณฑ์การย่อยสลายด้วยแสงของ reserpine นั้นอยู่ในส่วนเฮเทอโรไซคลิก (รูปที่ 2c และ 3c)

รูปที่ 1 สเปกตรัมมวลของรีเซอร์พีนและสารประกอบที่ย่อยสลายด้วยแสง (โหมดเกลียว)

รูปที่ 2 สเปกตรัมมวลไอออนผลิตภัณฑ์ของรีเซอร์พีน (a) องค์ประกอบของไอออนที่อนุมานได้ (b) และช่องการกระจายตัวโดยประมาณ (c)

รูปที่ 3 สเปกตรัมมวลไอออนของผลิตภัณฑ์ของผลิตภัณฑ์การย่อยสลายด้วยแสงของรีเซอร์พีน (a) องค์ประกอบของไอออนที่อนุมานได้ (b) และช่องการกระจายตัวโดยประมาณ (c)

สรุป

SpiralTOF™-plus2.0 พร้อมตัวเลือก TOF-TOF มีค่าการคัดแยกของไอออนตั้งต้นสูง เพื่อให้ได้รับสเปกตรัมมวลไอออนของผลิตภัณฑ์ของรีเซอร์พีนและผลิตภัณฑ์ที่ย่อยสลายด้วยแสงซึ่งแตกต่างกันเพียง 2 u แยกกัน สามารถระบุไอออนของ Adduct ได้จากสเปกตรัมมวลไอออนของผลิตภัณฑ์ และด้วยเหตุนี้ จึงเป็นไปได้ที่จะจำกัดองค์ประกอบที่คัดเลือกได้ให้แคบลง สเปกตรัมมวลไอออนของผลิตภัณฑ์ที่ได้รับมีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างทั้งสอง และโครงสร้างทางเคมีของพวกมันสามารถอธิบายได้จากสเปกตรัมมวลไอออนของผลิตภัณฑ์ที่มีลักษณะเฉพาะ