CRYO ARM™ 300 (JEM-Z300FSC) กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบปล่อยประจุภาคสนาม

JEM-Z300FSC (CRYO ARM™ 300) ซึ่งติดตั้งปืนปล่อยก๊าซในทุ่งเย็น ตัวกรองพลังงานโอเมก้าในคอลัมน์ ขั้นตอนการทำความเย็นไนโตรเจนเหลวแบบเข้าด้านข้าง และระบบแลกเปลี่ยนชิ้นงานทดสอบอัตโนมัติ เป็นกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบใช้ความเย็น (cryo -EM) ที่ช่วยให้สามารถสังเกตโมเลกุลชีวภาพได้ที่อุณหภูมิเย็นจัด ระบบแลกเปลี่ยนสิ่งส่งตรวจอัตโนมัติมีคุณสมบัติในการเก็บตัวอย่างได้มากถึง 12 ตัวอย่าง นอกจากนี้ ระบบยังอนุญาตให้มีการแลกเปลี่ยนตัวอย่างหนึ่งหรือหลายตัวอย่างโดยพลการ ทำให้สามารถตั้งเวลาได้อย่างยืดหยุ่น นอกจากนี้ การใช้ตัวกรองพลังงาน Omega ในคอลัมน์ที่ออกแบบใหม่และแผ่นเฟสแบบไม่มีรูร่วมกันช่วยเพิ่มความเปรียบต่างของภาพ TEM ของตัวอย่างทางชีวภาพอย่างมาก

คุณสมบัติ

ระบบแลกเปลี่ยนตัวอย่างอัตโนมัติ

ระบบนี้ประกอบด้วยขั้นตอนของชิ้นงานทดสอบเพื่อทำให้ตัวอย่างเย็นลงจนถึงอุณหภูมิไนโตรเจนเหลว และระบบถ่ายโอนด้วยความเย็นเพื่อถ่ายโอนตัวอย่างที่เย็นลงไปยังขั้นตอนแช่แข็งโดยอัตโนมัติ ไนโตรเจนเหลวจะถูกส่งไปยังถังไนโตรเจนเหลวโดยอัตโนมัติตามต้องการ ระบบอัตโนมัตินี้มีการจัดเก็บตัวอย่างได้มากถึง 12 ตัวอย่างและการแลกเปลี่ยนตัวอย่างหนึ่งตัวอย่างหรือมากกว่านั้นตามอำเภอใจ ในขณะที่ตัวอย่างที่เหลือจะถูกทำให้เย็นระหว่างขั้นตอนของชิ้นงานทดสอบกับระบบแลกเปลี่ยนชิ้นงานทดสอบ

ปืนปล่อยสนามเย็น (Cold FEG)

Cold FEG จะสร้างลำอิเล็กตรอนที่มีความสว่างสูงด้วยการแพร่กระจายของพลังงานที่น้อยมาก ทำให้มีความสอดคล้องกันสูง ดังนั้น CRYO ARM™ 300 จึงให้ภาพที่มีความคมชัดสูงและมีความเปรียบต่างสูง

ตัวกรองพลังงานโอเมก้าในคอลัมน์

มาพร้อมกับตัวกรองพลังงาน Omega ในคอลัมน์ CRYO ARM™ 300 รับภาพที่กรองพลังงานและสเปกตรัมการสูญเสียพลังงาน ภาพที่สูญเสียไปเป็นศูนย์ซึ่งได้รับจากกล้องจุลทรรศน์จะให้คอนทราสต์สูงโดยลดความคลาดเคลื่อนของสี

ซอฟต์แวร์รับภาพอัตโนมัติสำหรับการวิเคราะห์อนุภาคเดี่ยว

CRYO ARM™ 300 รวมซอฟต์แวร์อัตโนมัติ ซอฟต์แวร์นี้ช่วยให้สามารถตรวจจับรูบนกริดของชิ้นงานทดสอบโดยอัตโนมัติเพื่อให้ได้ภาพการวิเคราะห์อนุภาคเดี่ยวอย่างมีประสิทธิภาพ

แผ่นเฟสแบบไม่มีรู ^*1

แผ่นเฟสที่ไม่ซ้ำกันนี้เหมาะสำหรับความเปรียบต่างที่สูงขึ้นในตัวอย่างทางชีวภาพซึ่งเดิมให้คอนทราสต์ต่ำเท่านั้น

ฟังก์ชั่นการปรับอัตโนมัติ ^*2

มีระบบโฟกัสอัตโนมัติ การจัดตำแหน่งอัตโนมัติโดยไม่โคม่า การส่องสว่างด้วยลำแสงคู่ขนานอัตโนมัติ และการปรับอัตโนมัติอื่นๆ ช่วยให้ได้ภาพภายใต้สภาวะที่เหมาะสม

• หน่วยเสริม

• ใช้ภาพที่ได้มาจากกล้องติดด้านล่าง

ข้อบ่งชี้จำเพาะ

เครื่องมือหลัก

ขั้นตอนของตัวอย่าง / ระบบแลกเปลี่ยนตัวอย่างอัตโนมัติ

ดาวน์โหลดแคตตาล็อก

CRYO ARM™ 300 (JEM-Z300FSC) กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบปล่อยประจุภาคสนาม

การใช้งาน

แอปพลิเคชัน JEM-Z300FSC

ไครโอโน้ต

การพัฒนาทางเทคนิคของอิเล็กตรอน Cryomicroscopy และการมีส่วนร่วมในวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต

รูปภาพ

อ้างอิง

ช่องแยกช่องว่าง Innexin-6

เงื่อนไขการทดลอง

• ตัวอย่าง: Innexin-6 (Caenorhabditis elegans)

• กล้องจุลทรรศน์: CRYO ARM™300 (300kV CFEG) พร้อม Gatan K2

• ซอฟต์แวร์ที่ใช้ในการรับภาพ : JADAS (1974 ภาพ)

• จำนวนอนุภาค: 91,613 (ปิ๊กอัพเริ่มต้น), 37,767 (สำหรับการสร้าง 3D)

• ซอฟต์แวร์ที่ใช้ในการวิเคราะห์ภาพ: Relion3

• ความละเอียด: 3.0 Å (ที่ FSC = 0.143)

อะโพเฟอริติน

ความละเอียดสูงสุด 1.53 Å โดย cryoEM 2019.02

เมาส์ apoferritin

phenylalanine

อะตอมของเมไทโอนีนกำมะถัน

โพรไบโอ

• คุณสมบัติเลนส์: Cold FEG 300 kV & Ω-type energy filter with 20 eV slit width

• ตัวตรวจจับ: Gatan K2 (ขนาดพิกเซลของภาพ: 0.495 Å, mag x100,000)

• ตาราง: Quantifoil 1.2/1.3 Cu 200 mesh เก็บไว้ในตัวโหลดอัตโนมัติเป็นเวลา 3 วันก่อนการรวบรวมข้อมูล

• จำนวนไมโครกราฟ: 974 รวบรวมตลอด 24 ชั่วโมง, 840 ใช้สำหรับการวิเคราะห์ภาพ

• จำนวนอนุภาค: 120,295 ใช้สำหรับการสร้างใหม่ขั้นสุดท้าย ซอฟต์แวร์: RELION 3.1b, CTFFIND4

• ซอฟต์แวร์: RELION 3.1b, CTFFIND4

• ความละเอียด: 1.53 Å (ปัจจัย B: 47)

• หมายเหตุ: 56 ภาพแรกเพียงอย่างเดียวสร้างแผนที่ความละเอียด 1.76 Å (ปัจจัย B: 45)

พลาสมิด apoferritin ของเมาส์จาก Yanagisawa, Danev & Kikkawa @Tokyo University
Kato, Makino, Nakane, Terahara, Kaneko, Shimizu, Motoki, Ishikawa, Yonekura & Namba 2019.02 (EMDB-9865)

ß-กาแลคโตซิเดส

β-galactosidase 2.43 Å ความละเอียด CRYO ARM™

• ภาพการสอบเทียบแบบสามมิติของ β-galactosidase ที่ได้จากกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบไครโอ (CRYO ARM™ 200) ที่มีแรงดันเร่ง 200 kV

• ตัวอย่าง:
  เบต้า-กาแลคโตซิเดสกับ PETG

• กล้องจุลทรรศน์:
  CRYO ARM™ (Schottky 200 kV) / การประชุมสุดยอด K2

• จำนวนภาพ:
  2,500 ใน 3 วัน โดย JADAS

• ขนาดพิกเซลของภาพ:
  0.8 Å/พิกเซล

• จำนวนภาพอนุภาค:
  350,000 (รถกระบะครั้งแรก), 88,564 (สำหรับการสร้าง 3D ขั้นสุดท้าย)

• ซอฟต์แวร์:
  Motioncor2, Gctf, Gautomatch, Relion2.0

• ปริมาณทั้งหมด:
  70 อี-/Ų (70 เฟรม (0.2 วินาที/เฟรม x 14 วินาที)

ข้อมูล: เอื้อเฟื้อโดย Dr. T. Kato and Dr. K. Namba, Osaka University, สิงหาคม 2017

ข้อมูลเพิ่มเติม